叶下珠复方Ⅱ号对肝癌Hep3B细胞裸鼠移植瘤生长和miR-122及IGF-1R表达的影响

作者：徐玉洁; 覃万莉; 李小翚; 李常青^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(23): 28-35.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230724

• 叶下珠复方Ⅱ号
• 肝癌
• 胰岛素样生长因子1受体
• 肝细胞核因子4α
• CCAAT增强子结合蛋白α

目的：观察叶下珠复方Ⅱ号对Hep3B2.1-7人肝癌细胞(简称Hep3B细胞)裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其机制。方法：建立肝癌Hep3B细胞裸鼠移植瘤模型，并随机分为模型组、叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组(57.5、28.75 g·kg-1)和5-氟尿嘧啶(5-FU)组(0.025 g·kg-1)，每组8只。叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组均灌胃给药，每日1次；模型组予同体积生理盐水灌胃；5-FU组采用腹腔注射，隔日1次。给药28 d后处死取移植瘤，以免疫组化(IHC)法检测瘤体组织细胞核抗原(PCNA)表达，以脱氧核糖核酸断裂原位末端标记(TUNEL)法检测瘤体组织细胞凋亡，以实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测移植瘤组织miR-122和胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的mRNA表达，以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测瘤体组织CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、肝细胞核因子-4α(HNF-4α)和IGF-1R的蛋白表达。结果：叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组和5-FU组的抑瘤率分别为74.90%、63.62%和64.15%，与模型组比较，5-FU组、叶下珠复方Ⅱ号各组的移植瘤瘤重均显著降低(P<0.01),5-FU组、叶下珠复方Ⅱ号各组肿瘤生长体积显著降低(P<0.01),5-FU组、叶下珠复方Ⅱ号各组移植瘤组织中细胞增殖PCNA阳性细胞变少、染色变浅，5-FU组、叶下珠复方Ⅱ号各组移植瘤组织凋亡细胞均明显增加(P<0.05, P<0.01),5-FU组、叶下珠复方Ⅱ号各组miR-122 mRNA表达均显著增加(P<0.01),5-FU组、叶下珠复方Ⅱ号各组IGF-1R mRNA表达显著下调(P<0.01),5-FU组、叶下珠复方Ⅱ号各组裸鼠移植瘤组织C/EBPα及HNF-4α的蛋白表达均显著上调(P<0.01)，叶下珠复方Ⅱ号高剂量组的IGF-1R蛋白表达明显下调(P<0.05)；与叶下珠复方Ⅱ号低剂量组比较，叶下珠复方Ⅱ号高剂量组的凋亡细胞显著增多(P<0.01)，叶下珠复方Ⅱ号高剂量组miR-122 mRNA表达显著上调(P<0.01)，叶下珠复方Ⅱ号高剂量组的C/EBPα和HNF-4α蛋白表达均显著上调(P<0.01)。结论：叶下珠复方Ⅱ号对Hep3B细胞裸鼠移植瘤生长具有明显的抑制作用，作用机制可能与增强转录因子HNF-4α和C/EBPα的表达从而增强miR-122的表达以抑制其靶基因IGF-1R的表达有关。

• 单位
  广州中医药大学