自身失活型慢病毒载体感染脐带血CD34~+细胞的方法及效率

作者：马平; 刘加军

来源：热带医学杂志, 2016, 16(01): 1-4+127.

• 自身失活型慢病毒载体
• 人脐带血
• CD34+细胞

目的研究自身失活型(SIN)慢病毒载体感染脐带血造血干细胞的方法及效率。方法利用钙转的方法实现携带有绿色荧光蛋白(GFP)的SIN慢病毒载体的包装,将浓缩后的病毒按照一定的感染复数(约为175)感染人脐带血CD34+细胞24 h,换正常培养基继续培养2 d后,利用流式细胞学方法检测CD34~+%及CD34~+GFP~+%,并对感染SIN慢病毒载体的CD34~+细胞进行集落形成能力检测。结果 SIN慢病毒载体感染CD34~+细胞24 h后,换正常培养基继续培养2 d,检测细胞CD34~+%可维持在97.80%,且感染效率可达34.20%;对比正常的脐带血CD34~+细胞及经SIN慢病毒载体感染后的CD34~+细胞,二者的集落形成能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过上述方法,在不影响脐带血CD34~+细胞体外分化能力的前提下,实现了SIN慢病毒载体对CD34~+细胞的有效感染。

• 单位
  中山大学附属第三医院