科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
【目的】优化马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)双链RNA干扰实验的条件。【方法】注射不同次数的干扰探针进行不同时间的干扰,通过实时荧光定量检测Pif基因的表达;通过扫描电子显微镜观察贝壳珍珠层内表面新生层的生长并分析不同组别贝壳的生长情况。【结果】注射60μg探针1次时,实验组Pif基因在外套膜套膜区相对表达量显著低于对照组,且实验组Pif基因6 d的相对表达量显著低于4 d;注射60μg探针2次时,8d Pif基因在外套膜套膜区的相对表达量显著低于对照组。扫描电子显微镜观察结果表明,所有实验组贝壳珍珠层均出现无序生长;与实验组4 d和8 d相比,6 d时新生珍珠层新生层边界完全被破坏,并且出现更多散乱的细小晶体。【结论】注射60μg双链RNA探针1次并在6 d后收集样品,为马氏珠母贝双链RNA干扰实验探究基因功能的稳定高效条件。
- 单位
