重组耻垢分枝杆菌Msmc~2-CFP10-ESAT6的构建

作者：吴雯; 张红宇; 黄汉菊; 范兴; 罗道泉; 吴少庭

来源：中国病原生物学杂志, 2009, 4(03): 187-190.

• 分枝杆菌
• 结核
• CFP10
• ESAT6
• 穿梭表达质粒
• 分枝杆菌
• 耻垢 Mycobacterium tuberculosis
• ESAT6
• CFP10
• shuttle expression plasmid
• Mycobacterium smegmatis

目的构建能表达结核分枝杆菌早期分泌蛋白CFP10-ESAT6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌。方法采用基因拼接(Gene SOEing)法体外扩增结核杆菌1hp-ESAT6融合基因,插入大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pB-CG3000,构建重组穿梭表达质粒pBCG3000-CFP10-ESAT6,电转化耻垢分枝杆菌mc2155,构建耻垢疫苗株Msmc2155-CFP10-ESAT6,热诱导表达CFP10-ESAT6融合蛋白,Western blot分析其免疫原性。结果经PCR、酶切及测序鉴定,证实成功构建重组质粒pBCG3000-CFP10-ESAT6,并在耻垢分枝杆菌中经热诱导表达出分子质量单位...

• 单位
  深圳市疾病预防控制中心; 深圳市慢性病防治院; 华中科技大学同济医学院