摘要
目的研究NK1R转录起始位点上游启动子近端E盒点突变对下游基因转录活性的影响。方法定位NK1R基因转录起始点上游近端E盒结构,克隆含近端E盒的启动子序列,对E盒进行点突变,构建野生型和突变型荧光素酶报告基因载体,分别与内参荧光素酶报告基因载体p GL4.74 hluc转染MCF-7细胞,根据转染质粒类型分为PGL3野生型组、PGL突变型组、PGL3-basic组。结果 PGL3野生型组NK1R荧光素酶载体相对表达量为0.75±0.05;PGL3突变型组荧光素酶载体NK1R相对表达量0.60±0.07;PGL3-basic组相对表达量为0.38±0.05。结论 E盒结构可以影响所在启动子对下游基因的转录激活作用,点突变可以降低对下游基因的转录活性。
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单位湖南医药学院; 怀化市第二人民医院