摘要

目的对比人气道平滑肌原代细胞不同提取的方法,探讨各个方法的利弊,为后续细胞实验提供基础。方法收集我院胸外科2019年3~10月行肺叶切除术肺癌患者的正常肺叶、段支气管标本15例,采用酶解离法和组织块贴壁法提取气道平滑肌细胞,倒置相差显微镜观察其生长情况,用免疫荧光法检验平滑肌中特异性α-actin的表达。结果使用组织块贴壁法和酶解离法分别进行细胞原代培养,15例均成功,成功率100%,污染率为0。组织块贴壁法平均5~7天可见细胞贴壁生长,15~20天出现融合;酶解离法平均7~10天可见细胞增多融合。传代后细胞呈"峰-谷"生长。免疫荧光法鉴定气道平滑肌细胞纯度达到95%。结论两种方法都能提取人气道平滑肌原代细胞并进行后续培养,组织块贴壁法对细胞活力影响小,且经济方便,值得推广使用。