摘要

目的制备人乳头瘤病毒-16(human papillomavirus type-16,HPV-16)L1蛋白抗体,并验证HPV-16鼠源单抗的特性。方法以HPV-16 L1蛋白分别免疫BALB/c小鼠及新西兰大耳白兔,制备HPV-16鼠源单抗及兔血清多抗,建立检测HPV-16抗体的双抗夹心ELISA方法;鉴定鼠源单抗的特异性、热稳定性,并验证方法的准确性。结果制备的HPV-16鼠源单抗最高效价为5. 5×106,兔血清多抗效价为2. 25×107。该鼠源单抗仅与灭活病毒HPV-16呈阳性反应,而与灭活病毒HPV-18、HPV-52及HPV-58无交叉反应,于37℃保存6 d,蛋白稳定性良好;灭活HPV-16浓度在1~50μg/mL范围内时,检测偏差率在5%以内。结论成功制备了HPV-16鼠源单抗,其特异性强,热稳定性良好,建立的双抗夹心ELISA法检测准确,为早期临床HPV筛查及治疗效果评价提供了可能。

全文