六味地黄汤含药血清对CoCl_2诱导HK-2细胞后E-cadherin、α-SMA表达的影响

作者：王茜; 成细华; 刘春燕; 徐文峰; 张熙; 张海英; 王晖; 唐群^*

来源：湖南中医药大学学报, 2022, 42(04): 557-563.

• 六味地黄汤
• 缺氧
• 上皮-间充质转化
• 肾纤维化

目的 观察六味地黄汤含药血清对CoCl_2缺氧后HK-2细胞中的上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）和α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin, α-SMA）的影响。方法 体外培养HK-2细胞，分为3组：正常组（10%空白血清）、模型组（10%空白血清+200μmol·L~(-1)CoCl_2）、含药血清组（10%含药血清+200μmol·L~(-1)CoCl_2）。CCK-8法检测不同浓度空白血清、含药血清（2.5%、5%、10%、20%、40%）在24、36 h对HK-2细胞存活率的影响；以及不同浓度CoCl_2（150、200、300、600μmol·L~(-1)）在24 h的最佳干预浓度。qRT-PCR法和Western blot法分别检测各组E-cadherin、α-SMA的mRNA和蛋白表达水平；免疫荧光观察各组E-cadherin、α-SMA蛋白表达情况。结果 CCK-8法确定含药血清和空白血清的最佳干预浓度和干预时间分别为10%和24 h;CoCl_2的最佳干预浓度为200μmol·L~(-1)。与正常组比较，模型组E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）、α-SMA明显升高（P<0.05）；与模型组比较，含药血清组E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）、α-SMA明显降低（P<0.01）。结论 缺氧能诱导HK-2细胞发生EMT，六味地黄汤含药血清能够降低α-SMA的表达，升高Ecadherin的表达，从而缓解肾小管EMT。

• 单位
  湖南省脑科医院; 湖南中医药大学; 湖南中医药大学第一附属医院