人乳腺癌抗雌激素药物耐药蛋白1基因siRNA慢病毒载体的构建与鉴定

作者：黄伟; 范小青; 王如文; 邓波; 蒋耀光; 赵云平; 郭伟

来源：中国生物制品学杂志, 2013, (01): 17-21.

DOI：10.13200/j.cjb.2013.01.22.huangw.028

• 乳腺癌抗雌激素药物耐药蛋白1
• RNA干扰
• 慢病毒
• 肺癌
• A549细胞 Breast cancer anti-estrogen resistance 1(BCAR1)
• RNA interference
• Lentivirus
• Lung cancer
• A549 cells

目的构建人乳腺癌抗雌激素药物耐药蛋白1(Breast cancer anti-estrogen resistance 1,BCAR1)基因siRNA慢病毒载体,并进行鉴定。方法针对人BCAR1基因靶序列设计并合成4条siRNA序列(PLVT350、PLVT351、PLVT352、PLVT353)及1条阴性对照序列(PLVT4),分别退火后,插入经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切的慢病毒载体pMagic 4.1中,连接产物转化感受态大肠杆菌DH5α,经PCR和DNA测序筛选阳性克隆,提取重组干扰质粒,与辅助质粒共同感染293T细胞,进行慢病毒包装,浓缩后,采用梯度稀释法测定病毒滴度。将重组慢病毒感染A...

• 单位
  第三军医大学大坪医院