摘要
载体构建是分子生物学实验中的重要环节,其构建技术的创新性研发极大地推动分子生物学技木的不断进步。目前使用的载体构建技术有常规的酶切连接法、重叠延伸PCR法、同源重组法等。常规的酶切连接法在多片段的克隆中费时费力,而以Gateway为代表的同源重组法需购置昂贵的试剂。载体的改造主要指定点突变,包括碱基替换、缺失和插入三种类型的修饰。目前有多种方法可用于载体改造,但对于复杂的载体突变和改造,例如多位
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单位农业部; 中国热带农业科学院热带生物技术研究所; 海南医学院