二甲双胍对肺泡上皮细胞氧化损伤的抑制作用及其机制

作者：李鹏; 欧阳运萍; 陈涛; 赵博; 杨小军^*

来源：山东医药, 2023, 63(32): 40-44.

• 二甲双胍
• 急性肺损伤
• 氧化应激
• 肺泡上皮细胞
• 核因子κB
• 细胞迁移
• 上皮—间质转化

目的 观察二甲双胍对过氧化氢(H2O2)诱导的人肺泡上皮细胞A549氧化损伤的抑制作用，并基于上皮—间质转化(EMT)及核因子κB(NF-κB)信号通路调控探讨相关机制。方法 体外培养A549细胞并分为对照组、模型组、二甲双胍组、BAY 11-7082组、抑制剂组和激活剂组。对照组不给予药物干预，模型组、二甲双胍组、BAY 11-7082组、抑制剂组、激活剂组均给予400μmol/L H2O2刺激24 h构建体外急性肺损伤细胞模型；二甲双胍组分为三个浓度亚组，分别给予2.5、5、10 mmol/L的二甲双胍；BAY 11-7082组加入5 mmol/L的NF-κB信号通路抑制剂BAY11-7082；根据CCK-8法检测细胞活力结果，选择5 mmol/L为二甲双胍最佳作用浓度，抑制剂组、激活剂组造模后给予5 mmol/L二甲双胍，并分别加入5μmol/L的BAY 11-7082和1μmol/L的NF-κB信号通路激活剂Prostratin。各组均干预24 h。倒置显微镜下观察细胞形态；采用ELISA法检测细胞培养液上清中的丙二醛(MDA)和超氧化物岐化酶(SOD)；采用细胞划痕试验测算细胞迁移率；采用Western blotting法检测细胞中的EMT相关蛋白及NF-κB信号通路相关蛋白。结果 模型组细胞较对照组生长受到抑制、细胞形态不规则、细胞碎片增多，MDA、细胞迁移率、N-钙黏蛋白、波形蛋白、纤维黏连蛋白及p-NF-κB p65蛋白水平升高，SOD、E-钙黏蛋白水平降低(P均<0.05)；二甲双胍组和BAY 11-7082组细胞生长抑制作用较模型组减弱、细胞形态正常、细胞碎片少，MDA、细胞迁移率、N-钙黏蛋白、波形蛋白、纤维黏连蛋白及p-NF-κB p65蛋白水平降低，SOD、E-钙黏蛋白水平升高，且抑制剂组较二甲双胍组上述指标变化更显著(P均<0.05)；激活剂组上述指标变化趋势与二甲双胍组相反(P均<0.05)。结论 二甲双胍对H2O2诱导的A549氧化损伤具有抑制作用，可能与其阻滞NF-κB信号通路、抑制细胞迁移和EMT有关。

• 单位
  唐山职业技术学院