骨肉瘤MG-63细胞中Polo样激酶2的表达和定位

作者：沈涛; 傅永慧; 李妍; 梁爽; 梁峰; 巴根; 付勤

来源：现代肿瘤医学, 2012, 20(05): 882-885.

DOI：10.3969/j.issn.1672-4992.2012.05.03

• hPlk2
• Western blot
• 免疫沉淀 hPlk2
• Western blot
• immunoprecipitation

目的:构建真核表达载体*3 Flag-hPlk2并检测其在骨肉瘤细胞内的表达及定位。方法:以GST-hPlk2为模板,利用PCR扩增hPlk2基因cDNA全长,并将其克隆至含有*3 Flag标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切和测序鉴定,并转染到骨肉瘤细胞MG-63中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用共聚焦激光扫描显微镜观察*3 Flag-hPlk2在MG-63细胞中的定位,免疫沉淀法纯化hPlk2蛋白。结果:hPlk2基因cDNA全长成功构建到真核表达载体*3 Flag中,Western blot检测到*3 Flag-hPlk2融合蛋白表达,分子量约为80kDa。...

• 单位
  中国医科大学; 中国医科大学附属盛京医院; 基础医学院