摘要
目的目前关于熊果酸对甲状腺癌细胞增殖抑制作用的研究相对较少,文章拟探讨熊果酸对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖抑制作用及机制。方法待TPC-1细胞贴壁后弃原培养基,分别加入不含胎牛血清的熊果酸培养基(浓度分别为0、2、4、8、16、32μmol/L,其中以0μmol/L为对照),再以不含细胞的培养基为空白对照组。在不同时间(24 h、48 h)采用CCK8试剂对TPC-1细胞增殖抑制率进行检测;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;JC-1试剂盒检测熊果酸作用于TPC-1细胞后其线粒体膜电位变化情况;利用荧光探针DCFH-DA对熊果酸干预后的TPC-1细胞进行活性氧检测;采用流式细胞仪检测细胞中存活素及血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达情况;qRT-PCR实验检测不同浓度的熊果酸对TPC-1细胞进行干预后细胞中存活素及VEGF mRNA的表达情况。结果 2、4、8、16、32μmol/L熊果酸对TPC-1细胞抑制率较0μmol/L明显升高(P<0.01),48 h熊果酸对TPC-1细胞抑制率较24 h明显升高(P<0.05)。TPC-1细胞抑制率与熊果酸浓度及时间呈正相关(P<0.05)。0、4、8μmol/L熊果酸的细胞凋亡率分别为(4.13±0.61)%、(6.53±0.65)%、(13.13±1.59)%,随熊果酸药物浓度的增加,TPC-1细胞凋亡率逐渐增加(P<0.05)。4、8μmol/L熊果酸存活素、VEGF的蛋白及mRNA相对表达量较0μmol/L熊果酸明显降低(P<0.05),8μmol/L熊果酸较4μmol/L熊果酸明显降低(P<0.05)。结论熊果酸可有效抑制TPC-1细胞的增值并诱导其凋亡,其抑制诱导途径考虑与细胞中存活素、VEGF的表达相关。
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单位河北省人民医院