黄瓜再生和遗传转化体系优化

作者:苗永美; 简兴*; 张开京
来源:安徽科技学院学报, 2022, 36(03): 12-20.
DOI:10.19608/j.cnki.1673-8772.2022.0029

摘要

目的:建立黄瓜高效、稳定离体再生和转化体系。方法:选用10个黄瓜品种,研究基因型、外植体及植物生长调节剂对黄瓜不定芽诱导和生根影响,正交试验优化转化条件,Gus化学组织染色法鉴定。结果:只有子叶节能直接诱导出不定芽,而子叶远轴端、下胚轴和胚根只膨大、愈伤化,但难以再分化;华北型两个品种的子叶节诱导能力较差,其它8个基因型无明显差异;6-BA比TDZ和KT更适合‘EC5’和‘Chipper’子叶节不定芽诱导;优化培养基分别为MS+1.0~1.5 mg/L 6-BA+0~0.3 mg/L ABA+2 mg/L AgNO3、MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L ABA+1.0 mg/L AgNO3;1/2MS生根效果最好,生根率达100%,平均根数为5.70;抑制‘EC5’和‘Chipper’芽分化的Hyg临界浓度分别为5~8 mg/L、8~10 mg/L;抑菌剂为200 mg/L Carb,‘Chipper’子叶节农杆菌介导的遗传转化条件为:预培养1 d, EHA105浓度OD600值为0.6~0.8,侵染时间为12~16 min,共培养3 d,添加50~75μmol/L乙酰丁香酮(AS)条件下转化率最高。结论:本研究为黄瓜遗传转化提供技术参考。

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