人小肠3D类器官研究P-糖蛋白模型的构建方法和应用

作者:王昕; 赵军芳; 曾之扬; 张远金; 李大力; 刘明耀
来源:2016-05-23, 中国, ZL201610345283.2.

摘要

本发明公开了一种人小肠3D类器官研究P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)模型的构建方法。本发明中,首先将人小肠隐窝接种于基质胶中,加入含有特定生长因子的ADMEM/F12培养基进行培养以形成3D类器官;然后进行形态观察,并从mRNA和蛋白水平检测P-gp的表达;最后采用共孵育的方法,以罗丹明123(Rhodamine 123,Rh123)为底物,研究维拉帕米(Verapamil)和米托坦(Mitotane)对Rh123转运的影响。所述人小肠3D类器官研究P-gp的模型可应用于P-gp介导的药物转运研究,所述人小肠3D器官研究P-gp的模型也可广泛应用于P-gp抑制剂的体外高通量筛选,所述方法高效、快速。