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摘要
目的 探讨心脑舒通胶囊(Xinnao shutong, XNST)及其单体成分对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤脑微血管内皮细胞屏障结构及紧密连接蛋白表达的影响及机制。方法 将小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3接种于Transwell小室上层，建立OGD/R损伤模型，通过细胞跨膜电阻值及荧光素-钠透过率考察药物对内皮细胞屏障完整性的影响；采用Claudin-5免疫荧光染色观察内皮细胞间紧密连接结构变化；RT-PCR和Western blot法检测紧密连接蛋白Claudin-5、Occludin、ZO-1的mRNA和蛋白表达水平。Western blot法检测MAPKs (JNK、p38、ERK)、I kappa B α、I kappa B激酶磷酸化蛋白表达水平，Western blot及免疫荧光法检测NF-κB/p65的入核表达。结果 XNST及其3个单体成分均能明显增加内皮细胞电阻值，降低荧光素-钠透过率；Claudin-5荧光染色结果显示，模型组细胞间紧密连接明显破坏，而XNST及其单体成分能明显改善其紧密连接结构。RT-PCR及Western blot结果显示其能明显上调Claudin-5、Occludin和ZO-1的mRNA及蛋白表达，进一步对其机制研究表明，XNST及其单体成分能明显抑制JNK、p38、ERK的磷酸化，抑制I kappa B α、I kappa B激酶磷酸化，并明显抑制NF-κB/p65的核转位。结论 XNST及单体成分均可通过增加细胞间紧密连接结构促进屏障完整性发挥脑保护作用，其机制可能与抑制NF-κB和MAPKs信号通路激活有关。
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