同位素稀释液相色谱串联质谱衍生法测定血清游离雌三醇方法的建立

作者：张莹; 程晓东; 胡玉皎; 童开; 周铁成; 郝晓柯^*

来源：热带医学杂志, 2019, 19(10): 1229-1232.

• 雌三醇
• 液相色谱串联质谱
• 同位素

目的建立同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC-MS/MS)衍生法测定血清游离雌三醇的检测方法,为临床提供可靠,准确的检测结果。方法取700μL血清样品,乙醚萃取,用0.5 mg/mL吡啶-3-磺酰氯丙酮溶液和0.1 mol/L NaHCO3溶液衍生化后对样品进行检测分析。以[2,3,4-13C3]E3为内标,选用菲罗门Knietex色谱柱(100.0 mm×2.1 mm,2.6μm),用乙腈-水为流动相,在电喷雾离子(ESI)源正离子模式下,选择多反应监测(MRM)模式进行检测。结果建立了以离子对质荷比(m/z)430→366和(m/z)430→288为雌三醇的定量和定性的监测离子对,以(m/z)433→369为内标的监测离子对,在去簇电压(DP)45,碰撞能量(CE)36的条件下建立了质谱方法。该方法低值样品第1天、第2天、第3天的批内精密度和批间精密度分别为4.96%、4.48%、6.13%、7.10%,中值样品第1天、第2天、第3天的批内精密度和批间精密度分别为3.58%、4.31%、4.17%、5.03%,高值样品第1天、第2天、第3天的批内精密度和批间精密度分别为4.84%、4.78%、4.63%、4.95%。正确度低值标准品和高值标准品的偏移分别为-10.00%和-2.13%,低值标准品和高值标准品的回收率分别为90.00%和97.87%,最低检测限为0.5 ng/mL。所有性能指标都满足临床样品的分析要求。结论基于ID-LC-MS/MS衍生法测定血清游离雌三醇的检测方法灵敏度高、准确性好,可以用于临床血清样品中游离雌激素水平的定量分析。

• 单位
  西京医院; 中国人民解放军空军军医大学