分子佐剂TBhsp和MT在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体制备中的作用

作者：曹燕飞; 吕娟; 孟麟; 曲立科; 寿成超

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2014, 30(06): 614-626.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006950

• 肝细胞再生磷酸酶-3
• 结核分枝杆菌热休克蛋白
• 结核分枝杆菌T细胞刺激表位

目的探讨结核分枝杆菌热休克蛋白(TBhsp)和结核分枝杆菌T细胞刺激表位(MT)在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体(mAb)制备过程中的佐剂作用。方法构建对照质粒pET28a-PRL-3和佐剂-PRL-3融合蛋白表达质粒pET28a-PRL-3-MT、pET28a-TBhsp-PRL-3和pET28a-TBhsp-PRL-3-MT,并纯化其表达蛋白,分别免疫BALB/c小鼠,ELISA检测并比较各组的抗血清效价,选取效价最高的小鼠,采用杂交瘤技术制备PRL-3 mAb,并进行类和亚类鉴定。结果成功构建了上述4种PRL-3相关的重组表达质粒,并表达纯化出相应的融合蛋白,其中PRL-3-MT融合蛋白免疫组抗体效价高于其他组;用该组小鼠进行细胞融合并筛选获得均为IgG类的10株分泌PRL-3 mAb的细胞株。结论 MT在PRL-3 mAb制备中可以发挥较为明显的免疫佐剂作用。

• 单位
  北京市肿瘤防治研究所; 生物化学教研室; 首都医科大学附属北京朝阳医院; 长治医学院; 恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室