牛源二肽基肽酶-IV的高效制备及性质

作者:赵嘉妮; 陈宏; 陈寅格; 翁凌; 张凌晶; 张志刚; 林家仕*; 曹敏杰*
来源:食品科学, 2022, 43(16): 194-200.

摘要

以高效制备二肽基肽酶IV(dipeptidyl peptidase-IV,DPP-IV)为目的,以牛肾为原料,经酸沉淀、硫酸铵盐析和凝胶过滤层析获得高纯度DPP-IV。还原条件下,纯化蛋白的分子质量为106 kDa,纯化倍数为169.9,得率为9.5%。对该蛋白进行质谱鉴定得到12个肽段,共517个氨基酸残基,与牛DPP-IV氨基酸序列的匹配度为100%。对其性质研究发现,DPP-IV为糖蛋白且以二聚体形式(210 kDa)存在,等电点为5.8。DPP-IV的二级结构具有典型的β-折叠构象,热变性温度为(72.7±0.3)℃。金属离子Zn2+、Fe2+及Fe3+对DPP-IV活力有明显的抑制作用,1 mmol/L的Zn2+对DPP-IV力抑制率高达98%。