重组人胰岛素原基因在培养的大鼠肝癌细胞中基因转移和表达

作者：王玉霞; 袁凤山; 吴志香; 杨立新; 杜宁; 刘兆喆

来源：中国病理生理杂志, 2007, 23(02): 242-245.

DOI：10.3321/j.issn:1000-4718.2007.02.008

• 葡萄糖
• 胰岛素
• 肝肿瘤
• 基因转移
• 基因表达

目的:探讨含有葡萄糖反应元件的重组人胰岛素原基因在培养的大鼠肝癌细胞中基因转移及表达情况。方法:将含有3点突变及2点突变的人胰岛素原基因转染至大鼠肝癌CBRH7919细胞,测定不同葡萄糖浓度下瞬时及用G418筛选稳定表达后胰岛素的分泌量,并检测基因整合情况。结果:①转染后38 h及1个月,不同葡萄糖浓度下,含有3点突变胰岛素原基因的肝癌细胞胰岛素分泌量不同;含有2点突变胰岛素原基因的肝癌细胞,只有在25 mmol/L的葡萄糖浓度培养液中,才能测出胰岛素分泌量;②阳性克隆细胞基因组扩增出特异目的电泳条带,未转染细胞无此条带。结论:①用逆转录病毒为载体能将重组人胰岛素原基因转染到肝癌细胞中,并使之稳定表达。②所构建的重组人胰岛素原基因能指导靶细胞随葡萄糖浓度的变化调节胰岛素分泌。

• 单位
  辽宁沈阳; 中国医科大学附属第一医院