猪链球菌2型05Z33强毒株转录调控因子Rgg基因敲除突变体的构建及毒力分析

作者：王中胜; 袁媛; 尉研; 曾小涛; 郑玉玲; 姜永强

来源：生物技术通讯, 2010, (05): 705-710.

• 猪链球菌2型
• 转录调控因子
• 基因敲除 Streptococcus suis type 2
• transcriptional regulator
• gene knock-out

目的:构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33转录调控因子Rgg的基因敲除突变体,观察其生物学性状,并在动物感染实验中比较敲除株与野生株的毒力差异,为进一步研究猪链球菌转录调控因子在致病中的作用提供实验基础。方法:分别以猪链球菌2型05ZYH33基因组和pSET1质粒为模板,扩增基因SSU05_1997两侧各约500 bp的片段为上下游同源臂,氯霉素(Cm)抗性基因为中间片段,采用重叠PCR方法连接3个片段;连接产物先克隆到T载体上,再经过酶切克隆到温度敏感自杀载体pSET4S上;将构建的基因敲除载体pSET4S-1997电转化入05ZYH33感受态细胞,通过改变培养温度筛选出基因敲除突变体05Z...

• 单位
  华中农业大学; 军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室