菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征模型大鼠突触体SNARE蛋白复合体的影响研究

作者：冯鹏; 孙治前; 罗文珍; 史正刚^*; 李玉霞; 吴丽萍; 尚菁; 田文霞; 陈静

来源：南京中医药大学学报(自然科学版), 2021, 37(05): 709-719.

DOI：10.14148/j.issn.1672-0482.2021.0709

• 菖蒲郁金汤
• 抽动秽语综合征
• 突触体
• SNARE蛋白复合体

目的研究菖蒲郁金汤对抽动秽语综合征(Tourette syndrome, TS)模型大鼠突触体中SNARE蛋白复合体的调控作用,揭示菖蒲郁金汤治疗TS的药效机制。方法选择3周龄SD大鼠240只,依据随机数字表将SD大鼠分为空白组(60只)和造模组(180只),采用3,3’-亚氨基二丙腈(IDPN)腹腔注射法制备TS动物模型。造模成功后,再次随机将造模组大鼠分为模型组、硫必利组及菖蒲郁金汤组,每组60只。从造模完成后次日(即d0)开始灌胃给药,空白组与模型组给予生理盐水,其余各组给予相应药物,每日1次,连续给药4周。各组大鼠分别于第0、7、14、21、28天(即d0,d7,d14,d21,d28),随机抽取12只大鼠,麻醉后取纹状体,采用Percoll密度梯度离心法制备纹状体中的突触体,并在透射电镜下进行形态学鉴定。ELISA法检测纹状体多巴胺(Dopamine, DA)含量,qPCR和Western blot法检测突触体中SNAP-25、Syntaxin-1a和VAMP-2 mRNA及蛋白的表达,免疫组织化学法检测纹状体上述指标的表达。结果与空白组相比,模型组各观察点纹状体中DA含量降低(P<0.01),突触体/纹状体中SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA及蛋白的表达量显著降低(P<0.05,P<0.01);与模型组相比较,硫必利组及菖蒲郁金汤组在干预期间的各观察点(d7,d14,d21,d28)纹状体中DA含量以及突触体/纹状体内SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA及蛋白的表达量呈逐渐升高趋势。在治疗结束后(d28),菖蒲郁金汤组突触体中SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2 mRNA,Syntaxin-1a蛋白及纹状体中SNAP-25、VAMP-2蛋白的表达高于硫必利组(P<0.05,P<0.01)。结论菖蒲郁金汤通过调控SNAP-25、Syntaxin-1a、VAMP-2的表达促进DA的释放,进而发挥其抗抽动的作用。

• 单位
  甘肃中医药大学附属医院; 甘肃中医药大学; 河西学院