AS-PCR法鉴别炮制辅料鳖血和常见掺伪品的研究

作者：苏雪蓉; 谢颖; 娄悦; 苏联麟; 毛春芹; 赵晓莉^*; 陆兔林^*

来源：南京中医药大学学报(自然科学版), 2022, 38(10): 953-960.

DOI：10.14148/j.issn.1672-0482.2022.0953

• 鳖血
• 炮制辅料
• 等位基因特异性PCR鉴别

目的 建立一种炮制辅料鳖血等位基因特异性PCR(AS-PCR)鉴别方法，快速、准确地鉴别鳖血与其它常见动物血液。方法 通过比较鳖血基原中华鳖和驴、牛、羊、鸡、猪、兔为代表的常见动物的COⅠ序列差异，根据SNP位点设计鳖血特异性鉴别引物，优化PCR反应体系，并进行耐受性、适用性、掺伪灵敏度考察验证。结果 实验条件为退火温度62℃、循环次数29次、引物用量0.2μL、DNA模板浓度100 ng时，鳖血使用设计的ZHB286引物经PCR扩增和凝胶电泳后出现约286 bp的明亮条带，其他动物血液样品均无条带出现。结论 该AS-PCR鉴别方法具有高度特异性，能准确鉴别鳖血和其他常见动物血液，进而可用于鳖血与驴、牛、羊、鸡、猪、兔血掺伪鉴别，在血液类药材分子鉴定中具有广泛应用价值。

• 单位
  南京中医药大学