SAMHD1蛋白单克隆抗体的制备及SAMHD1在不同细胞中的表达鉴定

作者：戈曼; 吴星亮; 尹鑫; 魏萍; 王晓钧

来源：中国预防兽医学报, 2013, (03): 242-244.

• SAMHD1
• 单克隆抗体
• ELISA
• 免疫荧光
• 免疫印迹 SAMHD1
• monoclonal antibody
• immunofluorescence
• western blot

SAMHD1是最近发现的在人髓系细胞中发挥抗艾滋病毒作用的一种天然蛋白。为制备抗人huSAMHD1蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的人huSAMHD1重组蛋白为免疫原,经腹腔免疫4周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA法筛选和4次有限稀释法克隆纯化,获得了1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株。Western blot与间接免疫荧光试验结果表明,获得的MAb与人huSAMHD1的真核表达蛋白呈阳性反应,而与猴、马SAMHD1的真核表达蛋白呈阴性反应,表明其具有很好的特异性,可以用于ELISA、免疫荧光和免疫印迹检测以及对huSAMHD1的...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室