摘要

目的探讨内质网相关降解蛋白Derlin 1对宫颈癌C33A细胞自噬通路的影响。方法采用脂质体将HPV16 E6真核表达质粒pc DNA3. 1(-)-HPV16 E6、空质粒pc DNA3. 1(-)转染人宫颈癌C33A细胞,并筛选出稳定表达株;采用Western blot检测HPV16 E6过表达对HPV16 E6蛋白、内质网应激标志物GRP78蛋白、Derlin-1蛋白,自噬蛋白Beclin 1、P62表达的影响。采用脂质体将Derlin-1的干扰质粒PSUPER-siDerlin-1和空质粒PSUPER转染稳定表达HPV16 E6的C33A细胞; Western blot检测Derlin-1干扰质粒对Derlin-1蛋白、自噬蛋白Beclin 1、P62表达的影响。结果 HPV16 E6真核表达质粒pc DNA3. 1(-)-HPV16转染成功。与转染空质粒pc DNA3. 1(-)和未转染的细胞比较,转染pc DNA3. 1(-)-HPV16 E6后HPV16 E6蛋白过表达可以导致内质网应激,使GRP78蛋白、Derlin-1蛋白表达增加,同时使自噬蛋白Beclin 1表达增加,P62蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P <0. 05)。Derlin-1干扰质粒PSUPER-siDerlin-1转染成功。与转染空质粒PSUPER和未转染的细胞比较,PSUPER-siDerlin-1转染后Derlin-1蛋白表达降低,自噬蛋白Beclin 1、P62蛋白表达增加,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论 HPV16 E6蛋白过表达可以导致内质网应激,抑制Derlin-1蛋白表达可以阻断自噬溶酶体通路,Derlin-1可能是泛素—蛋白酶体通路和自噬—溶酶体通路之间的对话分子。