猪轮状病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者：陈小金; 陈建飞; 时洪艳; 张志榜; 冯力

来源：中国兽医科学, 2010, (02): 174-179.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2010.02.008

• 猪轮状病毒
• SYBR GreenⅠ
• 实时荧光定量PCR porcine rotavirus
• SYBR Green-Ⅰ
• real-time PCR

根据GenBank中登录的A群猪轮状病毒(PoRV)代表株OSU毒株序列,针对VP7基因设计了1对特异性引物,将150bp目的片段与pMD18-T载体连接构建标准品,建立了检测A群PoRV的SYBR GreenⅠreal-timePCR方法,并对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了评价。结果显示,该方法在1.3×108copies/μL～1.3×102copies/μL范围内线性关系良好,相关系数为0.999;最低检测限为1.3×101copies/μL;用该方法检测猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪病毒性腹泻病毒均为阴性;批内及批间变异系数均低于2%。表明,该方法敏感性...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室