结核分枝杆菌Rv3872基因的克隆、表达和纯化

作者：毕爱笑; **生; 刘忠华; 胡忠义

来源：中华临床医师杂志(电子版), 2008, (01): 79-85.

• 分枝杆菌
• 结核
• 克隆
• 分子
• 基因表达
• 纯化 Mycobacterium
• tuberculosis
• Cloning
• molecular
• Gene expression
• Purification

目的原核表达并纯化结核分枝杆菌Rv3872蛋白。方法聚合酶链反应(PCR)技术从结核分枝杆菌标准株H37Rv全基因组中扩增出的表达Rv3872基因序列,将其克隆到pMD18-T载体后,测序分析。亚克隆该目的基因到pET28a表达载体,最终转化至大肠杆菌BL21(DE3),获得正确的阳性克隆子后大量表达重组Rv3872蛋白,再经纯化、定量后,通过Westernblot分析其抗原性。结果扩增Rv3872基因经序列测定与GenBank公布的序列完全一致,表达蛋白经SDS-PAGE分析,在约15000kD处有表达条带,纯化后的重组蛋白占总蛋白的90%以上。免疫印迹分析显示重组的Rv3872蛋白具有抗原...

• 单位
  同济大学附属上海市肺科医院