清热化湿调枢方对溃疡性结肠炎小鼠肠道黏膜屏障功能的影响

作者：苏晓兰; 王琳; 张涛; 卿香丽; 张格知; 姚梦茜; 魏玮^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2022, 28(22): 68-75.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20222294

• 清热化湿调枢方
• 溃疡性结肠炎小鼠
• 肠黏膜屏障
• 作用机制

目的：基于肠道黏膜屏障功能的改变，探讨清热化湿调枢方对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的作用机制。方法：在36只C57BL/6小鼠中随机选取6只作为正常组，其余小鼠自由饮用2.5%的葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液7 d制作UC模型小鼠，造模后随机分为模型组、美沙拉嗪组、清热化湿调枢方高、中、低剂量组，每组6只。美沙拉嗪组给予0.52 g·kg-1·d-1混悬液灌胃，清热化湿调枢方高、中、低组分别用3.38、1.69、0.845 g·kg-1·d-1混悬液灌胃。正常组和模型组用等体积纯净水灌胃10 d。干预结束后，对比6组小鼠的一般状况、体质量、疾病活动指数(DAI)评分、结肠长度。使用苏木素-伊红(HE)染色对结肠组织进行病理分析，免疫组化法检测结肠组织中Ki67表达情况，使用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定结肠组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、剪切的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、Caspase-3蛋白表达量。结果：干预后，与模型组比较，美沙拉嗪组、清热化湿调枢方高、中剂量组可更好缓解UC小鼠腹泻、便血、体质量下降等症状，降低DAI评分(P<0.05)，恢复结肠形态(P<0.05)。美沙拉嗪组和清热化湿调枢方高、中剂量组结肠黏膜缺损及炎性细胞浸润较轻，具有较多完整隐窝干细胞。通过Western blot测定可以发现与模型组比较，美沙拉嗪组和清热化湿调枢方高剂量组MMP-9、cleaved Caspase-3蛋白表达量明显减低(P<0.05)，且两组差异无统计学意义，清热化湿调枢方高剂量组Caspase-3蛋白表达量降低(P<0.05)。结论：清热化湿调枢方可以有效缓解DSS诱导的UC，其作用机制可能与调控MMP-9、cleaved Caspase-3、Caspase-3的表达，促进肠黏膜屏障修复有关。

• 单位
  成都中医药大学; 中国中医科学院望京医院