Livin基因沉默对视网膜母细胞瘤细胞侵袭性的影响及其机制研究

作者：邓姿峰; 罗瑜琳; 汤文权

来源：眼科新进展, 2020, 40(12): 1130-1134.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2020.0251

• 视网膜母细胞瘤
• Livin
• 血管形成
• 侵袭

目的探讨Livin基因沉默对视网膜母细胞瘤细胞侵袭性的影响及其机制。方法体外培养视网膜母细胞瘤细胞Y79和视网膜色素上皮细胞ARPE-19,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot分别检测细胞中Livin的mRNA和蛋白表达水平。将Y79细胞分为对照组(细胞正常培养)、si-Livin组(转染Livin小干扰RNA)和si-NC组(转染乱序无意义阴性序列),CCK-8法检测各组细胞存活率,采用Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测各组细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-2(Ang-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的蛋白表达。结果与ARPE-19细胞中Livin的mRNA(1.01±0.06)和蛋白(0.18±0.07)表达比较,Y79细胞中Livin的mRNA(1.81±0.10)和蛋白(0.51±0.10)表达水平均显著升高(均为P<0.05)。与对照组[细胞存活率(99.87±1.36)%、细胞迁移能力(126.89±8.54)个、细胞侵袭能力(100.89±7.92)个]或si-NC组[细胞存活率(98.43±1.22)%、细胞迁移能力(120.44±7.51)个、细胞侵袭能力(99.56±7.23)个]比较,si-Livin组Y79细胞存活率[(46.27±1.73)%、细胞迁移能力[(58.00±5.68)个]和细胞侵袭能力[(37.56±4.30)个]及VEGF、Ang-2、MMP-2和MMP-9的蛋白表达水平均显著降低(均为P<0.05)。结论 Livin基因沉默可抑制视网膜母细胞瘤细胞的侵袭性,作用机制可能与下调血管形成相关因子VEGF、Ang-2、MMP-2和MMP-9的表达有关。

• 单位
  湖南省儿童医院