粟酒裂殖酵母N-糖酰胺酶在大肠杆菌中的表达、纯化及活性分析

作者：信丰学; 王鹏; 钟盛华; 祁庆生

来源：生物工程学报, 2008, (4): 592-597.

DOI：10.3321/j.issn:1000-3061.2008.04.011

• N-糖酰胺酶
• RT-PCR
• Ribonuclease B
• 酶活测定

根据GenBank中公布的粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)N-糖酰胺酶(Png1p)cDNA序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR技术从粟酒裂殖酵母中克隆出糖酰胺酶cDNA.将得到的基因克隆到表达载体pET-15b中.重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经诱导表达和纯化提取后,进行酶活测定.实验结果表明,该酶的分子量约为39 kD,纯化后的重组

• 单位
  江西农业大学; 微生物技术国家重点实验室; 山东大学