基于rDNA序列的酵母整合载体的构建及应用

作者：支晓慧; 王丽娜; 朱平; 王伟; 孔建强

来源：中国医药生物技术, 2011, (05): 330-335.

DOI：10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2011.05.003

• 酵母菌
• 酿酒
• DNA
• 核糖体
• 遗传载体
• 紫穗槐-4
• 11-二烯合酶 Saccharomyces cerevisiae
• DNA
• ribosomal
• Genetic vectors
• Amorpha-4
• 11-diene synthase

目的构建一个基于rDNA序列的酵母整合载体。方法通过PCR扩增得到酿酒酵母rDNA序列;通过常规分子生物学技术构建以rDNA序列为整合位点的酵母整合载体。为了确证该载体的效能,将青蒿紫穗槐-4,11-二烯合酶基因克隆到该载体上,构建了含紫穗槐-4,11-二烯合酶基因的整合型酿酒酵母工程菌。提取该工程酵母的基因组,通过紫穗槐-4,11-二烯合酶基因的特异引物进行扩增,确认紫穗槐-4,11-二烯合酶基因是否已整合到酵母基因组上。发酵酵母工程菌,对发酵产物进行GC-MS检测,确认是否产生紫穗槐-4,11-二烯。结果构建了1个酵母整合载体,具有如下特点:①能将外源基因表达盒序列整合到酿酒酵母rDNA序...

• 单位
  天然药物活性物质与功能国家重点实验室; 中国医学科学院; 北京协和医学院; 药物研究所