基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路探讨电针对阿尔茨海默病小鼠认知障碍的影响

作者：廖冬梅; 庞芳; 周敏; 李怡; 杨云昊; 郭啸; 唐成林^*

来源：针刺研究, 2022, 47(07): 565-572.

DOI：10.13702/j.1000-0607.20210604

• 阿尔茨海默病
• 脑-肠轴
• 电针
• TLR4/NF-κB/NLRP3通路
• 认知障碍

目的:观察电针对APP/PS1双转基因小鼠结肠和海马中紧密连接相关蛋白Claudin-5、ZO-1及海马Toll样受体4/核转录因子κB/NOD样受体蛋白3(TLR4/NF-κB/NLRP3)通路的影响，探讨电针改善阿尔茨海默病认知障碍的机制。方法:5月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、电针组，同月龄雄性C57BL/6小鼠作为对照组，每组9只。电针组电针“百会”“大肠俞”“足三里”,15 min/次，每周5次，干预5周。干预结束后，用Morris水迷宫评估小鼠学习记忆能力，尼氏染色法观察小鼠海马区病理形态，免疫组织化学法检测小鼠脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)表达，ELISA法检测小鼠结肠、血清、海马组织中脂多糖(LPS)含量，Western blot法检测小鼠结肠Claudin-5、ZO-1和海马Claudin-5、ZO-1及TLR4/NF-κB/NLRP3通路相关蛋白的表达。结果:与对照组比较，从第3天开始，模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05,P<0.01),穿越原平台次数、目标象限停留时间百分比显著减少(P<0.01),结肠、血清及海马组织中LPS含量显著升高(P<0.01),海马TLR4、NF-κB p65、NLRP3、 Caspase-1、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达及脑组织Aβ表达均显著升高(P<0.01),结肠及海马Claudin-5、ZO-1蛋白表达均显著降低(P<0.01)。与模型组比较，电针组小鼠第4、5天逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01),穿越原平台次数、目标象限停留时间百分比增加(P<0.01,P<0.05),血清及海马组织LPS含量降低(P<0.05),海马TLR4、NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、TNF-α蛋白表达及脑组织Aβ表达均降低(P<0.05,P<0.01),结肠及海马Claudin-5、ZO-1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。对照组小鼠海马CA1和CA3区神经元排列整齐、紧密；模型组神经元排列疏散，层数减少，部分细胞固缩、深染，尼氏小体数量减少；电针组神经元排列相对紧密，层数增加，无明显固缩，尼氏小体数量增加。结论:电针可能通过上调Claudin-5、ZO-1的表达，减少肠源性LPS向中枢易位，抑制中枢TLR4/NF-κB/NLRP3炎性通路过度活化，减轻中枢神经炎性反应，改善APP/PS1小鼠的认知障碍。

• 单位
  医药学院; 重庆医科大学