DDIAS在川崎病患儿血液中的表达及意义

作者：李敏; 张艳敏; 王娟莉; 刘百灵; 张倩; 卫晶丽; 高登峰^*

来源：现代生物医学进展, 2022, 22(02): 356-363.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2022.02.031

• DNA损伤诱导凋亡抑制因子
• 川崎病
• 冠状动脉损伤
• 炎症

目的：研究DNA损伤诱导凋亡抑制因子(DDIAS)在川崎病（KD）患儿血液中的表达及意义。方法：通过彩色多普勒超声心动图检查96例KD患儿的冠状动脉损伤（CAL）情况，根据CAL存在情况将患儿分为CAL组和非CAL组。选取我院同期体检的30例健康儿童作为对照组。通过ELISA试剂盒检测受试者外周血中DDIAS的水平。将靶向DDIAS的小干扰RNA(siRNA)(DDIAS-siRNA)和阴性对照siRNA(NC-siRNA)转染到人冠状动脉内皮细胞（HCAEC）中，并用10 ng/mL TNF-α处理细胞。通过RT-PCR分析细胞中的TNF-α、IL-6和HO-1 mRNA水平，通过Western blot分析DDIAS、NF-κB p65和I-κBα的蛋白水平。此外，评估了各组HCAEC细胞中的超氧化物和谷胱甘肽（GSH）含量及其与单核细胞的粘附。结果：与对照组比较，KD组的DDIAS水平显著升高（P<0.001）。与非CAL组比较，CAL组的DDIAS水平显著升高（P<0.01）。外周血DDIAS诊断KD的AUC、敏感性和特异性依次为0.747、65.62%和80.65%，外周血DDIAS诊断CAL的AUC、敏感性和特异性依次为0.733、63.83%和75.51%。与NC-siRNA+TNF-α组相比，DDIAS-siRNA+TNF-α组HCAEC细胞中的TNF-αmRNA表达水平降低了51.45%,IL-6 mRNA表达水平降低了59.46%，细胞核NF-κB p65的蛋白表达水平降低了26.40%，细胞质I-κBα的蛋白水平升高了91.30%(P<0.05)。与NC-siRNA+TNF-α组相比，DDIAS-siRNA+TNF-α组粘附实验的相对荧光强度降低了53.42%(P<0.05)。与NC-siRNA+TNF-α组相比，DDIAS-siRNA+TNF-α组HCAEC细胞中的超氧化物相对荧光强度降低了35.38%,HO-1 mRNA水平升高了1.35倍，GSH水平升高了94.59%(P<0.05)。结论：DDIAS对KD及CAL均有较高的诊断价值，下调DDIAS减轻TNF-α诱导的HCAEC细胞损伤。

• 单位
  西安交通大学第二附属医院; 西安市儿童医院