长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA表达文库的构建

作者：谢俊仁; 刘光远; 田占成; 李知新; 贾宁

来源：甘肃农业大学学报, 2007, (06): 13-17.

DOI：10.13432/j.cnki.jgsau.2007.06.022

• 长角血蜱
• cDNA表达文库
• 构建 Haemaphysalis longicornis
• cDNA expression library
• construction

为了克隆和研究具有免疫原性的长角血蜱基因,应用建库试剂盒成功构建了长角血蜱雌蜱唾液腺cD-NA表达文库.在无Rnase污染的环境下摘取半饱血长角血蜱雌蜱唾液腺,并从中提取RNA,进而纯化mRNA,利用oligo(dT)引物反转录合成双链cDNA,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头并酶切,过柱分级分离后,将cD-NA分子定向连接到具有EcoRⅠ/HindⅢ粘性末端的λSCREEN载体中.经体外包装转染E.coliERl647宿主菌,进行文库容量测定和扩增.以扩增文库的DNA为模板,利用载体通用引物检测cDNA文库中插入片断的大小和质量.经检测,所构建长角血蜱cDNA文库的基础库容量约为4...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 甘肃农业大学