柔嫩艾美耳球虫裂殖子全长cDNA文库的构建及应用

作者：王园园; 陈佳; 覃宗华; 吴彩艳; 廖申权; 戚南山; 吕敏娜; 孙铭飞; 蔡建平

来源：动物医学进展, 2012, (04): 26-30.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2012.04.025

• 柔嫩艾美耳球虫
• 裂殖子
• cDNA文库
• SMART技术 Eimeria tenella
• merozoite
• cDNA library
• SMART technique

为克隆柔嫩艾美耳球虫裂殖子阶段的功能基因的全长序列,利用SMART技术,采用Clontech公司的Creator TMSMARTTMcDNA Library Construction Kit构建了鸡球虫裂殖子的全长cDNA文库。用试剂盒提取mRNA后,以cDNA合成试剂盒合成cDNA。连接至pDNR-LIB载体,用电转化法将重组质粒转化到E.coli DH10B内得到原始文库,扩增后保存于-80℃冰箱内;最后以文库为模板,分别以研究室已成功克隆序列(EtSAG2、EtMIC-2、EtMCAT)及Sanger的部分EST序列(Contig1218)设计引物,进行PCR扩增并测序检验文库的实用性。...

• 单位
  广州英赛特生物技术有限公司; 河南农业大学; 华南农业大学; 广东省农业科学院