摘要
目的:探讨高迁移率族蛋白B1(High-mobility Group Box 1 protein,HMGB1)是否通过激活E2F转录调节因子3(E2F transcription factor 3,E2F3)促进卵巢癌细胞的增殖和侵袭作用。方法:选取本院2017年10月-2018年7月收治的38例卵巢癌患者。qRT-PCR、Western blot和免疫组化分别检测患者肿瘤组织和癌旁组织中HMGB1的表达;qRT-PCR和Western blot检测HMGB1在卵巢癌细胞系A2780、HO8910、ES-2和SKOV3中的表达;RNA沉默技术敲除HMGB1在SKOV3中的表达,同时CCK-8和Trans-well观察SKOV3细胞增殖和侵袭能力变化;RNA转录组测序(RNA transcriptome sequencing,RNA-seq)检测敲除HMGB1前后SKOV3细胞中mRNA的变化;qRT-PCR和Western blot检测验证RNA-seq结果;RNA沉默技术敲除E2F3在SKOV3细胞中的表达,同时CCK-8和Trans-well观察SKOV3细胞增殖和侵袭能力变化。结果:卵巢癌肿瘤组织中HMGB1表达显著高于癌旁组织(P<0.05);HMGB1在四种卵巢癌细胞系中的SKOV3细胞中表达最高(P<0.05);si-RNA基因沉默后,HMGB1在SKOV3细胞中几乎无表达,CCK-8和Trans-well实验表明HMGB1 si-RNA沉默后其增殖和侵袭能力显著被抑制(P<0.05);RNA-seq检测结果表明,HMGB1 si-RNA沉默后E2F3、叉状头转录因子3(Forkhead box protein P3,FOXP3)和趋化因子5(chemokine 5,CXCL5)下调倍数最明显其中E2F3下调倍数最高,同时在细胞系中验证结果显示同样结果(P<0.05);si-RNA基因沉默E2F3后,E2F3在SKOV3细胞中几乎无表达,CCK-8和Trans-well实验表明E2F3 si-RNA沉默后其增殖和侵袭能力显著被抑制(P<0.05)。结论:HMGB1可能通过上调E2F3的表达增加促进卵巢癌SKOV3细胞增殖和转移。
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单位西安医学院第二附属医院