摘要
目的观察miRNA-30e-5p对骨肉瘤U2OS细胞增殖和转移能力的影响及其分子机制。方法 qRT-PCR检测骨肉瘤组织和癌旁正常组织、人成骨h FOB细胞和骨肉瘤U2OS、Saos-2、MG-63细胞中miRNA-30e-5p的表达水平。通过脂质体转染构建U2OS细胞miRNA-30e-5p过表达模型和miRNA-30e-5p敲低模型,用克隆形成和CCK-8实验检测不同处理组细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞转移能力。Targetscan网站在线预测miRNA-30e-5p的下游靶基因并通过Western blot验证。Western blot检测miRNA-30e-5p对E-cadherin和N-cadherin蛋白表达的影响。结果与癌旁正常组织比较,miRNA-30e-5p在骨肉瘤组织中低表达(P <0.05);与人成骨h FOB细胞相比,miRNA-30e-5p在骨肉瘤细胞中低表达(P <0.05)。过表达miRNA-30e-5p降低骨肉瘤U2OS细胞增殖、转移能力(P <0.05)。敲低miRNA-30e-5p表达增加骨肉瘤U2OS细胞增殖、转移能力(P <0.05)。生物信息学预测USP22为miRNA-30e-5p的下游靶基因。过表达miRNA-30e-5p抑制USP22蛋白表达,敲低miRNA-30e-5p促进USP22蛋白表达。miRNA-30e-5p能降低E-cadherin蛋白表达、升高N-cadherin蛋白表达。结论 miRNA-30e-5p能够抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖、转移能力,其机制可能与抑制USP22蛋白表达相关。
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