间歇性高糖对大鼠胰岛细胞瘤细胞系Ins-1的损伤作用及对第10号染色体缺失的张力同源性磷酸酶表达的影响

作者：邵晨; 王晓黎; 王涤非; 李国姣; 郭妍; 董玉梅

来源：中华糖尿病杂志, 2015, 7(11): 689-693.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1674-5809.2015.11.007

• 间歇性高糖
• 大鼠胰岛细胞瘤细胞系Ins-1
• 第10号染色体缺失的张力同源性磷酸酶

目的探讨间歇性高糖对大鼠胰岛细胞瘤细胞系Ins-1的损伤作用及对第10号染色体缺失的张力同源性磷酸酶(PTEN)表达的影响。方法将:Ins-1细胞分为正常组(CG组,11.1 mmol/L葡萄糖培养)、持续高糖组(SHG组,33.3mmol/L葡萄糖培养)、间歇性高糖组(IHG组,11.1 mmol/L及33.3 mmol/L葡萄糖交替培养12 h),3组细胞均培养3 d。欧文比色法(MTS)测定细胞增殖活性,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V/PI)双染细胞后,以流式细胞仪测定各组细胞的凋亡率,放免法测各组细胞胰岛素分泌,2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针测定各组细胞内活性氧簇(ROS)水平,倒置相差显微镜下观察各组细胞形态,钙离子荧光探针法(Fluo 3-AM)测定细胞内钙离子浓度,Western blotting法测定各组细胞PTEN蛋白表达。各组内均数比较采用单因素方差分析。结果SHG组细胞凋亡率、细胞内ROS水平、细胞内钙离子浓度及PTEN表达均较CG组显著增加(t=8.310、10.261、17.890、5.123,均P<0.05),细胞增殖活性、胰岛素分泌均较CG组显著降低(t=-19.630、-2.053,均P<0.05)。IHG组细胞凋亡率、细胞内ROS水平以及钙离子浓度及PTEN表达均较CG组及SHG显著增加(t=6.20018.227,均P<0.05),细胞增殖活性、胰岛素分泌均较CG组及SHG组均显著降低(t=-27.800、-2.790、-8.167、-1.503,均P<0.05)。IHG组较SHG组及CG组Ins-1细胞异型性明显、细胞数量显著减少且排列紊乱。结论氧化应激参与高糖对Ins-1细胞的损伤作用,可能与PTEN表达增高有关,间歇性高糖对INS-1细胞的损伤作用较持续性高糖严重。

• 单位
  辽宁省人民医院; 中国医科大学附属第一医院