摘要

目的观察吉西他滨对巨噬细胞免疫功能的影响,并对其作用机制进行探讨。方法脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)共同诱导巨噬细胞Ana-1为M1型巨噬细胞。酶联免疫吸附试验(Elisa)检测细胞因子的表达、透射电子显微镜下观察自噬体的形成,激光共聚焦显微镜下观察巨噬细胞吞噬功能及活性氧和自噬体的产生,流式细胞术检测细胞周期的分布及组织相容复合体(MHC-Ⅱ)的表达,免疫印迹法检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达。结果吉西他滨能够抑制巨噬细胞的吞噬功能,并通过阻滞细胞周期、抑制自由基一氧化氮(NO)、活性氧(ROS)的分泌及白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、MHC-Ⅱ的表达从而抑制M1型巨噬细胞Ana-1的免疫功能。同时,吉西他滨还可抑制巨噬细胞自噬,表现为自噬体减少,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ表达量降低。吉西他滨联合自噬诱导剂海藻糖作用于活化的巨噬细胞,IL-6、TNF-α和MHC-Ⅱ的表达量较吉西他滨单独处理组均显著升高。结论吉西他滨可导致巨噬细胞免疫抑制,抑制巨噬细胞自噬,激活自噬可逆转吉西他滨对巨噬细胞的免疫抑制。

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