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摘要
目的探讨奥利司他对人胆囊癌细胞活性的影响。方法采用实验研究方法。通过体外培养人胆囊癌NOZ、GBC-SD、SGC-996细胞, 筛选出高表达FASN的人胆囊癌NOZ细胞采用细胞增殖、细胞克隆形成和蛋白检测实验, 分析奥利司他对人胆囊癌细胞活性的影响。人胆囊癌NOZ细胞分组:加入培养基设为NOZ细胞对照组, 加入培养基+10 μmol/L奥利司他设为奥利司他低浓度组;加入培养基+100 μmol/L奥利司他, 设为奥利司他高浓度组。观察指标:(1)FASN蛋白在人胆囊癌细胞中的表达情况。(2)奥司利他对人胆囊癌NOZ细胞增殖的影响。(3)奥司利他对人胆囊癌NOZ细胞凋亡的影响。正态分布的计量资料以x±s表示, 组间比较采用AVONA检验, 两两比较采用最小显著差异法。结果 (1)FASN蛋白在人胆囊癌细胞中的表达情况。Western blot检测结果显示:FASN蛋白在人胆囊癌NOZ、GBC-SD、SGC-996细胞中的相对表达量分别为0.57±0.06、0.12±0.04、0.10±0.02, 3者比较, 差异有统计学意义(F=115.67, P<0.05);NOZ细胞分别与GBC-SD、SGC-996细胞比较, 差异均有统计学意义(P<0.05)。GBC-SD细胞和SGC-996细胞比较, 差异无统计学意义(P>0.05)。(2)奥利司他对人胆囊癌NOZ细胞增殖的影响。①细胞增殖毒性实验结果显示:NOZ细胞对照组、奥利司他低浓度组、奥利司他高浓度组的吸光度分别为2.34±0.12、1.57±0.08、1.07±0.13, 3组比较, 差异有统计学意义(F=205.88, P<0.05)。②细胞克隆形成实验结果显示:NOZ细胞对照组、奥利司他低浓度组、奥利司他高浓度组的细胞克隆形成数目分别为(257±23)个、(153±11)个、(83±11)个, 3组比较, 差异有统计学意义(F=92.64, P<0.05)。③Western blot实验结果显示:NOZ细胞对照组、奥利司他低浓度组、奥利司他高浓度组中Cyclin-D1蛋白的相对表达量分别为2.31±0.10、1.52±0.05、1.23±0.11, 3组比较, 差异有统计学意义(F=120.73, P<0.05)。NOZ细胞对照组、奥利司他低浓度组、奥利司他高浓度组中CDK-4蛋白的相对表达量分别为1.58±0.04、1.21±0.02、1.19±0.04, 3组比较, 差异有统计学意义(F=110.45, P<0.05)。(3)奥利司他对人胆囊癌NOZ细胞凋亡的影响。Western blot实验结果显示:NOZ细胞对照组、奥利司他低浓度组、奥利司他高浓度组中Bcl-2蛋白的相对表达量分别为1.07±0.03、0.36±0.03、0.15±0.02, 3组比较, 差异有统计学意义(F=1 242.93, P<0.05)。NOZ细胞对照组、奥利司他低浓度组、奥利司他高浓度组中Bax蛋白的相对表达量分别为0.51±0.03、0.38±0.05、1.38±0.04, 3组比较, 差异有统计学意义(F=583.51, P<0.05)。结论奥利司他可以抑制人胆囊癌NOZ细胞的生长, 促进其凋亡。
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