MicroRNA-26a靶向高迁移率族蛋白A2抗体对肝癌细胞增殖及迁移的影响

作者：金若珏; 刘三海; 黄强; 吴春明; 周光伟

来源：中国基层医药, 2021, 28(10).

• 癌, 肝细胞
• 基因靶向
• HMGA2蛋白
• 细胞增殖
• 细胞迁移分析
• miR-26a
• 细胞生物学

目的探讨miRNA-26a(miR-26a)作用于靶向基因HMGA2在肝癌细胞增殖及迁移中的作用及其机制。方法收集2018年9月至2019年9月经温州市中医院病理证实的肝癌组织标本(n=30)及其癌旁正常组织标本(n=30)。将miR-26a模拟物、对照模拟物(miR-Control)、HMGA2 siRNA或阴性对照siRNA(Control)转染人肝癌细胞株HepG2或Huh-7细胞。采用逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-26a在肝癌组织中的表达情况。采用MTT试验和划痕试验测定细胞增殖和迁移能力。采用RT-qPCR和Western blot检测miR-26a与高迁移率组AT-hook 2(HMGA2)mRNA的表达情况。通过生物信息和荧光素酶报告基因分析miR-26a与HMGA2 mRNA的作用关系。结果 RT-qPCR结果显示, 肝癌组织miR-26a表达水平为(0.11±0.02), 较正常组织样本表达量的(0.25±0.03)明显降低(t=21.268, P<0.05);Ⅲ+Ⅳ期miR-26a表达水平为(0.05±0.01), 明显低于Ⅰ+Ⅱ期miR-26a表达水平的(0.09±0.01)(t=15.491, P<0.05)。细胞实验表明, miR-26a组在Huh-7[(3.10±0.30), (4.10±0.40)]和HepG2[(3.08±0.31), (4.11±0.40)]细胞中, 相比于对照组[(3.90±0.40), (5.50±0.60);(3.92±0.41), (5.49±0.58)]增殖能力降低(t=8.764、10.634, 11.148、10.728, 均P<0.05), 迁移能力[(0.50±0.06), (0.65±0.07)]相比于对照组[(1.00±0.10), (0.96±0.10)]同样明显降低(t=23.483、13.910, 均P<0.05)。生物信息学和体外实验表明, HMGA2是miR-26a的直接靶点。恢复miR-26a模拟转染细胞中HMGA2的表达, 相比miR-26a组[(0.24±0.02), (0.31±0.03);(0.45±0.05)], 可明显逆转miR-26a对肿瘤细胞增殖和迁移的抑制作用[(0.31±0.03), (0.40±0.04);(0.93±0.08)](t=10.634、9.859、27.868, 均P<0.05)。结论 miR-26a通过直接靶向HMGA2抑制肝癌细胞的增殖和迁移。miR-26a异常降低及其靶点HMGA2升高可能是参与肝癌发生、发展的重要因素。