摘要
目的:建立并完善再造工程化心肌组织研究中形态学检测项目平台。方法:取新生大鼠天然心肌组织固定,制作天然心肌石蜡组织切片;用胰酶消化法分离新生大鼠心肌细胞进行细胞爬片培养;以液态胶原为支架材料与来源于新生大鼠的心肌细胞在体外构建工程化心肌组织条带并进行力学拉伸刺激,进而对其进行固定处理,制作石蜡组织切片。之后将天然心肌组织、心肌细胞爬片和工程化心肌组织标本分别进行HE及心肌特异性标志肌钙蛋白T(cTnT)免疫组化染色,并对三者的形态学检测结果进行观察、分析。结果:天然心肌组织的HE及cTnT结果反映了三维立体正常心肌组织在体情况下组织结构、细胞形态、数量比例等组织形态学特点;心肌细胞爬片培养简便直观地反映了体外二维条件下的心肌细胞形态、数量及其比例的改变;工程化心肌组织检测则反映了三维立体再造心肌的组织结构、细胞形态、数量及比例改变。结论:设立天然心肌、心肌细胞爬片及工程化心肌组织三者的HE、cTnT免疫组化检测项目并对其结果进行对照分析,从二维与三维、在体与体外等方面,建立并完善了再造工程化心肌组织研究中形态学检测对照体系,提高了实验效率,节约了实验成本。
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单位军事医学科学院基础医学研究所