猪MITF-M的转录调控分析

作者：张廷焕; 柴捷; 陈磊; 龙熙^*

来源：畜牧兽医学报, 2018, 49(11): 2349-2358.

• 猪
• MITF-M
• 转录活性
• KLF4

旨在研究猪MITF-M(microphthalmia associated transcription factor M)转录调控区域活性以及验证重要转录因子。以猪DNA为模板,利用PCR扩增获得MITF-M转录调控区,基因克隆得到5′端缺失重组载体,运用双荧光素酶报告基因试验进行转录活性分析,再通过干扰RNA试验验证重要转录因子。本试验成功克隆得到MITF-M 6 414bp的转录调控区域;构建了9个调控区5′端缺失重组载体;鉴定出MITF-M转录调控区内3个转录活性显著变化区域(P<0.001),分别是位于-1 140～-1 397和-5 429～-6 036bp的正调控区域、-2 470～-3 753bp的负调控区域;发现了转录因子KLF4显著负向调控MITF-M的转录活性(P<0.01)。结果提示,转录因子KLF4抑制MITF-M的转录活性,调控黑色素细胞色素的合成与沉积,从而影响猪毛色的表型。本试验为进一步研究猪MITF-M基因的表达机制奠定了基础,对深入研究猪毛色变化的表达调控机理具有重要意义。

• 单位
  重庆市畜牧科学院; 农业部