摘要
背景:小鼠成骨能力受到JAK/STAT通路的调控,白细胞介素9能够通过JAK-STAT通路调控多种细胞的功能,有潜力成为调控成骨能力的新型细胞因子。目的:探究体内白细胞介素9的缺失对于小鼠成骨能力的影响。方法:将2月龄野生型小鼠(WT)和白细胞介素9基因全敲除小鼠(IL-9-/-)股骨进行Micro-CT扫描,分析其骨量变化;并分别对小鼠股骨切片行苏木精-伊红染色、Masson染色以及Ⅰ型胶原蛋白免疫组化染色。提取2月龄WT和IL-9-/-小鼠骨髓细胞进行骨髓间充质干细胞克隆形成实验,并检测成骨基因的表达。为了进一步验证白细胞介素9是否通过JAK-STAT通路进行信号传导,采用Western blot检测STAT3蛋白的表达。结果与结论:(1)Micro-CT扫描结果显示,相较于WT小鼠,IL-9-/-小鼠的骨量显著降低,骨密度、骨体积分数、骨小梁数目显著降低,骨小梁分离度显著增大;(2)苏木精-伊红染色与Micro-CT结果一致,IL-9-/-小鼠骨小梁密度更低;(3)Ⅰ型胶原蛋白免疫组化染色以及Masson染色结果显示,IL-9-/-小鼠Ⅰ型胶原蛋白阳性成骨细胞数量显著减少,同时胶原形成能力更差;(4)克隆形成实验结果表明,IL-9-/-小鼠成骨细胞的矿化能力显著低于WT小鼠;(5)Western blot结果显示,成骨诱导激活STAT3信号传导,WT成骨诱导组pSTAT3表达明显高于IL-9-/-成骨诱导组,说明白细胞介素9通过JAK-STAT3通路调控成骨,白细胞介素9的缺失抑制成骨细胞的分化与功能,这可能是IL-9-/-小鼠骨量降低的原因之一。
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单位苏州大学; 苏州大学附属第一医院