摘要
【目的】利用微生物发酵植物可以提高多糖的产量,并且能够将原有的植物多糖转化成活性更高的新型发酵多糖,本研究围绕天山雪莲的粗多糖,基于发酵后的活菌数、多糖产量和护肤功效进行发酵菌种筛选,旨在获得适宜发酵天山雪莲粗多糖的优良菌株。【方法】利用不同菌株发酵天山雪莲粗多糖,通过平板菌落计数法测定活菌数,采用蒽酮比色法测定发酵液的多糖含量;采用细胞屏障损伤和抗炎模型,利用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活率,利用格里斯法检测NO含量,评价发酵多糖在细胞模型中的护肤功效;利用特应性皮炎小鼠模型,分析发酵多糖对皮肤组织表观及经皮失水率、皮肤组织病理及表皮厚度变化和皮肤组织屏障蛋白-丝聚合蛋白的影响,评价发酵多糖在动物模型中的功效。【结果】不同菌株发酵天山雪莲粗多糖后的活菌数和多糖产量差异较大,其中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) CCFM1162和165-M1、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei) CCFM1073、罗伊氏乳杆菌(L. reuteri) CCFM8631、清酒乳杆菌(L. sakei) GD17-9的活菌数较高,均不低于2.0×108 CFU/mL;而酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) HN7-A5、干酪乳杆菌CCFM1073、罗伊氏乳杆菌CCFM8631、清酒乳杆菌GD17-9发酵天山雪莲粗多糖的多糖产量较高,达到1.37 g/L以上。综合多糖产量和活菌数,选取干酪乳杆菌CCFM1073、罗伊氏乳杆菌CCFM8631、清酒乳杆菌GD17-9、酿酒酵母HN7-A5的发酵多糖进行细胞护肤功效评价,结果显示所选菌株的发酵多糖对十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate, SDS)诱导的Ha Ca T细胞存活率影响不大,而清酒乳杆菌GD17-9、罗伊氏乳杆菌CCFM8631、干酪乳杆菌CCFM1073、酿酒酵母HN7-A5的发酵多糖对降低脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的RAW264.7细胞NO含量效果较好,其中清酒乳杆菌GD17-9、罗伊氏乳杆菌CCFM8631的发酵多糖分别降低了81%和71%。结合活菌数、多糖产量、细胞护肤功效评价,选取清酒乳杆菌GD17-9和罗伊氏乳杆菌CCFM8631发酵的天山雪莲粗多糖进行动物护肤功效验证,发现罗伊氏乳杆菌CCFM8631发酵天山雪莲粗多糖功效更好。【结论】综合活菌数、多糖产量以及细胞和动物模型的护肤功效,罗伊氏乳杆菌CCFM8631菌株是发酵天山雪莲粗多糖的最适宜菌株。
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