三棱提取物抑制糖酵解限速酶抗黑色素瘤机制研究

作者：刘洋; 郑秀芹; 杨葛俊; 赵涵; 陆茵; 王爱云; 陈文星^*

来源：南京中医药大学学报(自然科学版), 2022, 38(04): 331-338.

DOI：10.14148/j.issn.1672-0482.2022.0331

• 三棱
• 网络药理学
• 黑色素瘤
• 能量代谢
• 糖酵解

目的 探究三棱抗黑色素瘤的分子作用机制及其有效物质基础。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索三棱的活性成分及对应的靶点，利用GeneCards数据库检索黑色素瘤疾病靶点，借助Cytoscape3.7.2软件绘制药物-疾病靶点蛋白互作(PPI)网络，并筛选出核心靶点，再根据DAVID数据库平台进行KEGG通路富集分析；通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)实验、EdU增殖检测实验、海马能量代谢分析实验、代谢产物及酶活性检测试剂盒实验、蛋白质免疫印迹法(Western blot)实验进一步验证上述分析结果。结果 从TCMSP数据库中获得5个三棱中活性成分，对应的靶点共70个，与疾病靶点构建PPI网络并进一步筛选得到由86个核心靶点组成的关键网络，KEGG信号通路富集分析结果表明，三棱治疗黑色素瘤主要涉及代谢相关通路、p53信号通路、AMPK信号通路、MAPK信号通路、PI3K/Akt信号通路、凋亡信号通路等；体外实验结果表明，三棱提取物可剂量依赖性抑制黑色素瘤A375细胞的增殖，并降低细胞的胞外酸化率及糖酵解代谢产物丙酮酸、乳酸、ATP的生成，进一步结果表明，三棱提取物可抑制丙酮酸激酶的活性，并降低丙酮酸脱氢酶(PKM2)、乳酸脱氢酶(LDHA)、单羧酸转运蛋白(MCT4)的蛋白表达水平。结论 三棱提取物具有明显的抗黑色素瘤的作用，其作用机制可能与抑制糖酵解相关蛋白PKM2、LDHA、MCT4表达、干扰肿瘤细胞糖酵解代谢相关。

• 单位
  南京中医药大学