变异链球菌丙氨酸消旋酶基因表达纯化及活性测定

作者：郭笑; 邱伟; 周学东; 程磊; 李明云

来源：口腔医学研究, 2018, 34(06): 597-600.

DOI：10.13701/j.cnki.kqyxyj.2018.06.006

• 变异链球菌
• 丙氨酸消旋酶
• 右旋丙氨酸
• D-环丝氨酸

变异链球菌是口腔主要的龋病病原菌。丙氨酸消旋酶通过合成右旋丙氨酸(D-alanine,D-ala)参与细菌细胞壁肽聚糖的生物合成过程,与细菌性疾病密切相关,近年来成为抗菌药物的又一理想靶位。D-环丝氨酸(D-cycloserine,DCS)是丙氨酸消旋酶不可逆性抑制剂。本研究通过聚合酶链反应克隆变异链球菌UA159的smu.1834c基因,经过酶切、连接,构建重组表达质粒pET-smu.1834c,诱导表达重组,纯化蛋白。测定DCS对丙氨酸消旋酶活性的抑制作用。成功诱导表达纯化smu.1834c基因编码蛋白,具有体外催化L-丙氨酸生成D-丙氨酸的活性。发现DCS能够抑制该蛋白的活性。本研究证实变异链球菌smu.1834c基因编码丙氨酸消旋酶。DCS能够抑制其活性,并且呈现一定的剂量相关性。

• 单位
  口腔疾病研究国家重点实验室; 四川大学华西口腔医院