非洲猪瘟病毒解旋酶Q706L基因的生物信息学分析及原核表达

作者：王国超; 张忠辉; 白鸽; 赵亚茹; 吴奇强; 王一望; 孙华林; 杨吉飞; 关贵全; 殷宏; 罗建勋^*; 牛庆丽^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(12): 1545-1551.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0202

• 非洲猪瘟病毒
• Q706L基因
• 生物信息学
• 原核表达

为了解非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)解旋酶pQ706L的功能，通过生物信息学方法对GenBank中公布的不同基因型的ASFV解旋酶Q706L基因序列进行分析，运用在线软件ExPASy、GOR4、SWISS-MODEL对该蛋白的理化性质及结构进行了预测分析，并进一步构建原核表达载体进行诱导表达及纯化鉴定。结果显示：Q706L基因长度为2 121 bp，在不同毒株和基因型间高度保守；经ExPASy预测，pQ706L蛋白的分子式为C6440H10761N2121O2643S502，属于疏水性蛋白，稳定性差；GOR4预测的二级结构显示，α螺旋是其主要结构形式，占比为42.07%；三级结构预测报告QMQE值为0.38，覆盖率为66%。以ASFV-CN/SC/2019毒株基因组为模板，成功构建了原核表达质粒pET-30a-Q706L，进行诱导表达及SDS-PAGE分析，得到78.3 ku的蛋白。纯化后经Western-blot鉴定，获得了纯度较高的目的蛋白，该蛋白且能够与ASFV阳性血清发生特异性反应。上述研究结果为进一步解析该蛋白的功能奠定了基础。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 渭南市动物疫病预防控制中心; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心