炭疽AVA疫苗特异性抗体分泌细胞检测方法的建立

作者：吕进; 张松乐; 董梅; 何蕊; 江海燕; 张良艳; 邢丽; 杨海荣; 王希良

来源：免疫学杂志, 2007, (04): 452-455.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20070123

• AVA(炭疽无菌培养滤液佐剂吸附苗)
• ELISPOT(酶联免疫斑点)
• ASC(抗体分泌细胞)
• SFC(斑点形成细胞) Anthrax vaccine absorbed
• Enzyme linked immunospot
• Antibody secreting cell
• Spot forming cell

目的应用酶联免疫斑点(ELISPOT)技术,建立一种检测炭疽AVA免疫后特异性抗体分泌细胞的方法,用于检测和评价炭疽无菌培养滤液抗原特异性抗体形成细胞的功能。方法无菌分离小鼠脾细胞,建立一系列特异性ELISPOT检测炭疽无菌培养滤液抗原特异性抗体分泌细胞的参数:包括抗原最佳包被浓度、细胞最适孵育时间、反应体系中细胞浓度以及亲和素抗体工作浓度的确定,同时检测上清中抗体效价,并以不相关抗原包被,检验方法的敏感性和特异性。结果当抗原包被浓度为7.5μg/mL时,不同细胞浓度反应曲线最稳定;细胞数为5×106/mL时,不同包被浓度形成的斑点数适量,易于计数;且在抗体稀释度相同情况下,脾细胞孵育时间为3...

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院