血管损伤反应对血管平滑肌合酶Ⅰ和转录释放因子表达的影响及机制

作者：陈雪莹; 姚烨; 周高适; 陶诗婉; 陈兆煜; 谈智

来源：首都医科大学学报, 2017, 38(04): 546-552.

• 血管损伤
• 平滑肌细胞
• 泛素化
• 血管再狭窄

目的探讨聚合酶Ⅰ和转录释放因子(polymeraseⅠand transcript release factor,PTRF or Cavin-1)在损伤血管后血管再狭窄病理过程的作用及分子机制。方法将200220 g雄性Sprague Dawley大鼠采用数字表法随机分为假手术组和血管损伤组,血管损伤组制备颈动脉损伤动物模型。用苏木精伊红染色显示损伤后颈动脉的结构,免疫荧光、Western blotting检测损伤后血管的Cavin-1蛋白表达,real-time RT-PCR方法检测损伤后血管的Cavin-1 mRNA表达,免疫组织化学、Western blotting、免疫共沉淀法检测颈动脉泛素化蛋白的表达。大鼠动脉平滑肌细胞实验分为(1)空白对照组(control,CTRL);(2)CHX组:用放线菌酮(cycloheximide,CHX,25μmol/L)预处理1 h;(3)CHX+MG组:用CHX预处理1 h后,接着用MG 132(蛋白酶体抑制剂,10μmol/L)处理24 h;(4)CHX+CQ组:用CHX预处理1 h后,接着用氯喹(chloroquin,CQ,10μmol/L)处理24 h。应用Western blotting检测细胞Cavin-1蛋白浓度。结果动物模型中,球囊损伤后,血管壁明显增厚,Cavin-1表达显著下降(P<0.05),Cavin-1 mRNA表达差异不明显,泛素化蛋白表达显著上调(P<0.05)。细胞实验中,应用CHX预处理可明显降低平滑肌细胞Cavin-1的表达(P<0.05),而CHX+MG可以明显对抗CHX上述作用过程(P<0.05)。结论球囊损伤颈动脉后,血管的Cavin-1蛋白表达下调,其机制可能与增加的泛素化-蛋白酶体降解途径有关。

• 单位
  中山大学中山医学院; 神经内科; 中山大学附属第三医院